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山茶屬植物藥用研究的最新進展

山茶屬(CamilliaLinn.)植物屬于山茶科(Theaceae),是山茶科中最大的一個屬。有280種,主要分布于熱帶和亞熱帶。我國有250種以上,主要分布于西南至東南部,集中分布于嶺南地區[。藥用收載的有山茶(C.japonicaL.)的花(山茶花),油茶(C.oleiferaAbe1)的種子(茶子心),油茶種子的脂肪油(茶油),油茶榨去脂肪油的殘渣(茶子餅),茶(C.sinensis0.Ktze)的嫩葉(茶葉),果實(茶子)和根(茶樹根),普洱茶(C.sinensis0.Ktze.Var.as—samicaKitamura)的葉(普洱茶)及皋蘆(C.sinensis0KtzeVar.macrophyllasieb.)的葉(皋蘆)。其中茶油被中華人民共和國藥典所收載。

到目前為止除了茶和山茶外,其他山茶屬植物藥用價值研究甚少。人類學家已對山茶屬植物進行過分類、9-3類和多次修正。中山大學張宏達教授將山茶屬植物分為4個亞屬,22組,280個原種[。但由于山茶屬植物種類繁多,給分類、歸類帶來諸多困難。到目前為止,爭議仍很大。此前的專家認為按照花的顏色籠統地分為三大類,即紅花山茶、白花山茶和黃花山茶,由于黃花山茶的研究剛剛起步.本文只對紅花山茶、白花山茶作如下研究。

1紅花山茶的研究

紅花山茶約有50余種分布于4個組.目前共采集到南山茶(C.semiserrataChi)、廣寧油茶(C.pitardiiCoh.st)和怒江山茶(C.saluenensisstapfexBean)。它們都屬于山茶亞屬紅山茶組。目前南山茶的研究已取得最新進展。南山茶主要分布于廣東西南部和廣西的東南部,是具有明顯主干的小喬木。葉片漂亮,閃閃發光,葉脈凹陷,花朵碩大,紅色。蒴果卵球形,較大,長6.0—8.0cm,直徑4.0~7.0cm,是一種重要的油料樹種,含油量20.5%29.4%,油分質量好。其藥理活性和化學成分未見研究報道。我們的研究發現,南山茶種子具有非常強的抗骨質疏松作用。

1.1物質基礎的研究:前期的藥理學實驗研究發現,南山茶種子的95%乙醇提取物對維甲酸所致骨質疏松大鼠有較強的抗骨質疏松活性。在此基礎上,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水對乙醇提取物進行萃取,利用重組人雌激素基因酵母的方法檢測以上四個梯度極性部位的雌激素活性,明確了雌激素活性主要集中在乙酸乙酯層,其次為正丁醇層。在明確了抗骨質疏松有效組分的基礎上,采用各種色譜方法,如硅膠柱層析色譜、硅膠制備薄層層析色譜、SephadexLH一20凝膠柱層析色譜、高效液相色譜等.對95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇層的化學成分進行了分離,共得到14個單體化合物。通過理化常數、波譜解析等方法鑒定了其中12個化合物的結構。隨后利用重組人雌激素酵母檢測了化合物的雌激素活性,確認黃酮類化合物為南山茶種子抗骨質疏松的有效成分。

1.2藥效及作用機制的研究:在維甲酸造成的大鼠實驗性骨質疏松的實驗中發現,南山茶種子中的黃酮類成分具有雌激素樣抗骨質疏松作用。可使血清鈣含量明顯增加,明顯提高模型大鼠血清堿性磷酸酶水平、降低抗酒石酸酸性磷酸酶水平。松質骨鏡下檢查可見成骨細胞明顯增多,破骨細胞明顯減少,說明其對骨吸收有明顯抑制作用。對骨形成有明顯促進作用;明顯提高股骨重量/長度(G/L)比值,增加骨密度,同時股骨無機物及鈣含量有一定提高趨勢,使骨小梁明顯向正常水平轉化,表明對大鼠骨質疏松有明顯的預防和治療作用。

采用重組人雌激素受體基因酵母法對南山茶抗骨質疏松有效部位的研究證明,其黃酮類化合物可與雌激素受體結合,表現雙向調節作用。具有明顯雌激素活性的同時又有較強的抗雌激素活性。同時用重組人孕激素受體基因酵母法對其抗孕激素作用的研究中還發現,其有效部位表現出明顯的拮抗孕激素效應。因孕激素受體能降低雌激素受體(ER)的轉錄活性.也就是說抑制孕激素受體活性能夠增強體內雌激素受體的表達。

作用機制:①通過活化ER促進骨細胞增殖。實驗研究證明。雌激素缺乏是絕經后婦女骨質疏松(PMOP)的首要病因。PMOP為高轉換型的骨質疏松癥.稱原發I型。現已證明人類成骨細胞和破骨細胞中有ER,植物雌激素可通過對骨的靶細胞直接作用而發揮對骨的調節作用:②通過拮抗孕激素活性提高ER的轉錄和表達;③通過增加成骨細胞堿性磷酸酶活性,促進骨礦化。堿性磷酸酶是成骨細胞分化的一個早期指標,可識別及評價成骨細胞的分化程度.其表達隨著細胞分化的發展而增強,是骨形成必需的酶。堿性磷酸酶可分解有機磷酸釋放無機磷,增加局部無機磷的濃度,促進礦化,其活性升高可為細胞間質含量做好準備,并且是啟動礦化的必備條件。1-3構效關系的研究:目前從植物中發現的選擇性雌激素受體調節劑(SERMs),按照化學結構可分為8類。其中的苯并吡喃類,因結構母核與1713一雌二醇、己烯雌酚和生育素(VE)相似而具有雌激素活性。黃酮類化合物都具有苯并吡喃基本母核,這是南山茶種子中黃酮類化合物具有雌激素活性的重要原因之一。

除此之外,從構效關系上來看,南山茶種子中的黃酮類化合物的雌激素活性還有兩個主要特點:①糖上的乙酰基越多,活性越強。在濃度0.05g/L時,5個乙酰基、4個乙酰基、3個乙酰基、單乙酰基(苷元)的誘導率依次為159.9%、119.7%、114.2%、81-4%:②B環上的酚羥基越多活性越強。木犀草素為5,7,3,4一四羥基,而山柰酚為3,5,7,4一四羥基..當濃度O.O1g/L時,木犀草素的誘導率是87.33%,而山柰酚是39.90%。

2白花山茶的研究

白花山茶是種類最多的一類山茶屬植物,近90種,分布于l2個組。其中油茶是山茶屬植物中分布最廣、產量最大、資源最豐富的一個品種,廣布于長江以南。據不完全統計中國有油茶面積366萬公頃.僅廣西就有600萬畝。它隸屬于山茶亞屬油茶組該組通常為白花,略芳香,種子含油量高,是重要的油料作物。因為分布的原因,國外對油茶的研究甚少,而國內主要是對茶油的營養價值和茶麩用于水產養殖業清塘消毒的研究。化學研究僅見到對黃酮類化合物的分離鑒定,未見到皂苷類單體的分離報道。我們對油茶的研究取得了突破性進展,獲得了創新性成果。如前所述,對紅花山茶南山茶的研究發現抗骨質疏松的有效成分是黃酮類化合物,而對油茶的研究發現其種子(油粕)具有非常強的抗腫瘤、抗殺軟體動物、體外殺精子(陰道抗生育)、抗真菌、抗病毒、抗寄生蟲作用,其有效部位皂苷類成分,稱油茶皂素。故此,我們采用正交試驗對其提取工藝進行了優選,并采用D101大孔樹脂對其進行了富集,同時通過D941大孔樹脂進行脫色。得到油茶皂苷含量>95%的制備工藝。目前已從油茶皂素中分離了13個單體皂苷。

3小結

黃花山茶由于發現的晚,且分布特殊,所以幾乎未見任何研究。金花茶組植物原種集中分布在中國廣西壯族自治區的西南部以及廣西壯族自治區與越南接壤的區域。另外,貴州西南部和云南東南部與廣西壯族自治區接壤的區域也有少量分布。現已采集到8個品種即顯脈金花(C.euphlebiaMerr.exSealy)、金花茶(C.nitidissimaChi)、凹脈金花茶(eimpressinrvischangetS.Y.Liang)、毛瓣金花茶(C.pubipetalaWangetHuang)、毛籽金花茶(C.ptilospertlza S.Y.LiangetQ.D.chen)、落葉金花茶(C.Chrysan—thoideschang)、中東金花茶(C.achrysamthachangets.Y.Liang)和夏石金花茶(C.xiashiensiss.Y.LiangetC.Z.Deng)。對它的研究目前正在展開。

我們對山茶屬植物的研究.雖然取得了一定進展,但還是剛剛開始。為了使山茶屬植物的研究更加深入,使我們的研究能在國際山茶屬植物研究領域占一席之地、獲得自主知識產權,我們還將進行更廣泛的深入研究。
 

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